您的位置:首頁> 內(nèi)科> 心血管內(nèi)科 > 怎么進行細胞復(fù)蘇

怎么進行細胞復(fù)蘇

更新時間:2025-03-19 14:51:07

細胞復(fù)蘇常見的方法有快速解凍法、常規(guī)解凍法、分步解凍法、程序降溫復(fù)蘇法、特殊細胞復(fù)蘇法等。

1. 快速解凍法:

將凍存細胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴鍋中,迅速解凍,期間要不斷輕輕搖動凍存管,使其受熱均勻,直至細胞完全解凍。然后將細胞轉(zhuǎn)移至離心管中,加入適量培養(yǎng)液,離心去除凍存液,再用新鮮培養(yǎng)液重懸細胞,接種到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

2. 常規(guī)解凍法:

從液氮中取出凍存細胞,先置于-80℃冰箱中放置一段時間,再轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱放置一段時間,最后放入4℃冰箱平衡一段時間后,取出在室溫下放置片刻,再進行后續(xù)的離心、重懸和培養(yǎng)操作,逐步使細胞適應(yīng)溫度變化。

3. 分步解凍法:

先將凍存細胞從液氮中取出,在-80℃放置1 - 2小時,然后在-20℃放置1 - 2小時,接著在4℃放置2 - 4小時,之后在室溫放置15 - 30分鐘,最后按常規(guī)方法離心、重懸和培養(yǎng),這種方法能讓細胞更平緩地適應(yīng)溫度上升。

4. 程序降溫復(fù)蘇法:

利用程序降溫儀,按照設(shè)定的降溫程序,使細胞從低溫狀態(tài)逐步回升到適宜溫度,能更精確地控制溫度變化,減少對細胞的損傷,之后同樣進行離心、重懸和培養(yǎng)。

5. 特殊細胞復(fù)蘇法:

對于某些特殊類型的細胞,如干細胞等,可能需要特定的復(fù)蘇條件和培養(yǎng)基,要根據(jù)細胞的特性進行相應(yīng)的調(diào)整,以保證細胞的活性和功能。

細胞復(fù)蘇過程中,要確保操作環(huán)境無菌,使用的試劑和器材都需符合要求。同時,要根據(jù)細胞的種類和特性選擇合適的復(fù)蘇方法,操作過程要輕柔、迅速,避免細胞受到過多損傷,以提高細胞復(fù)蘇的成功率。

審編醫(yī)生
李婷婷全科 副主任醫(yī)師 醫(yī)院:山東大學(xué)齊魯醫(yī)院

主治疾?。荷瞄L內(nèi)科系統(tǒng)疾病,尤其是冠心病、高血壓、高血脂、代...詳情>

用藥指導(dǎo)

/吃什么藥好
康艾扶正膠囊
康艾扶正膠囊
適應(yīng)癥狀:苗醫(yī)布西汗吳苯,漳砧泱安洗儂,擋嘔,仃網(wǎng)[說明書]
貴州漢方藥業(yè)有限公司
六甲蜜胺膠囊
六甲蜜胺膠囊
適應(yīng)癥狀:本品用于卵巢癌﹑SCLC﹑惡性淋巴瘤﹑子[說明書]
通化茂祥制藥有限公司
拉司太特
拉司太特
適應(yīng)癥狀:本品適用于小細胞肺癌,惡性淋巴瘤。[說明書]
Takasaki Pl